96孔酶標(biāo)板的類型與操作使用注意事項(xiàng)

　　通常使用96孔微孔板。盡管不同制造商生產(chǎn)的微孔板相似，但在某些小細(xì)節(jié)(例如某些結(jié)構(gòu))上會(huì)有所不同，這主要是由于不同的酶標(biāo)儀的合作。

　　96孔酶標(biāo)板的類型：

　　它分為可分離和不可分離。對(duì)于不可拆卸，即將整個(gè)板上的板條連接在一起，則可拆卸的是將板上的板條分開，并且分開的板條有12個(gè)孔和8個(gè)孔。常用的是可拆卸的微孔板。如果您以前購(gòu)買過這些板，則可以購(gòu)買一些微板。盡管不同制造商生產(chǎn)的微孔板總體上看起來相似，但某些小細(xì)節(jié)也會(huì)有所不同，例如結(jié)構(gòu)。這主要是由于使用了不同的酶標(biāo)儀。因此，在選擇購(gòu)買微孔板時(shí)，還應(yīng)考慮微孔板閱讀器的外觀。但是，它們通常是經(jīng)過修改的，只有個(gè)別的會(huì)有所不同。因?yàn)槊赴宓牟牧贤ǔＪ?PS)，并且(PS)的化學(xué)穩(wěn)定性很差，所以它可以被多種有機(jī)溶劑(例如芳烴，鹵代烴等)溶解，并且會(huì)被腐蝕通過強(qiáng)酸和強(qiáng)堿。它不耐油脂，并且在紫外線照射后很容易變色，因此在使用過程中必須注意這些。

　　96孔酶標(biāo)板的操作使用注意事項(xiàng):

　　1.添加樣品：將樣品稀釋液添加到涂層板上，用PBS或生理鹽水按1:20的比例稀釋待測(cè)血清，然后向微孔板的反應(yīng)孔中添加10ul。

　　2.添加對(duì)照：添加3孔陰性對(duì)照，1孔陽(yáng)性對(duì)照和100ul對(duì)照血清。

　　3.孵育：搖動(dòng)反應(yīng)板以使樣品充分混合，然后將其置于37°C的培養(yǎng)箱或水浴中20分鐘。

　　4.洗滌板：用蒸餾水將15ml洗滌溶液稀釋至300ml。用手洗滌時(shí)，應(yīng)倒出反應(yīng)板孔中的內(nèi)容物，并用洗滌液充滿孔中的位置，然后靜置30秒以使其劇烈搖動(dòng)。重復(fù)此操作5次，然后拍干。機(jī)洗需要執(zhí)行5次。可以將200ul洗滌溶液注入每個(gè)孔中或?qū)⑵涑錆M，然后放置30秒鐘并吸干。

　　5.添加酶標(biāo)記的工作溶液：向每個(gè)孔中添加100ul酶標(biāo)記的工作溶液，放置在37°C的培養(yǎng)箱中，反應(yīng)20分鐘后洗板5次。洗滌板的操作與上述步驟4相同。

　　6.這是反應(yīng)的后一步，是顯色和反應(yīng)終止：將50ul底物添加到反應(yīng)孔中，并在37°C的黑暗中顯色10分鐘。停止每個(gè)孔的溶液并混合以終止反應(yīng)。

　　微孔板的使用應(yīng)在無菌條件下進(jìn)行。在使用微孔板之前和之后，請(qǐng)仔細(xì)對(duì)其進(jìn)行消毒和清潔，但是應(yīng)注意，某些微孔板在滅菌之前需要仔細(xì)閱讀說明，以查看它們是否可以在高溫下進(jìn)行滅菌。

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