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Elisa試劑盒標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液及樣品準(zhǔn)備

更新時(shí)間:2025-08-13    點(diǎn)擊次數(shù):382

  Elisa試劑盒標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液及樣品準(zhǔn)備

  以下是ELISA試劑盒標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液及樣品準(zhǔn)備的規(guī)范流程和注意事項(xiàng):

  一、標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液制備?

  稀釋液選擇原則?

  血清/血漿/組織勻漿樣本:使用試劑盒配套的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液(通常含1% BSA的PBS)

  細(xì)胞上清樣本:建議用細(xì)胞培養(yǎng)基稀釋以保持基質(zhì)一致性

  配制方法?

  10×濃縮液按1:9比例用1× PBS(pH 7.2-7.4)稀釋為工作液

  現(xiàn)配現(xiàn)用,避免長(zhǎng)期儲(chǔ)存導(dǎo)致成分沉淀或變質(zhì)


  標(biāo)準(zhǔn)品稀釋步驟:

標(biāo)準(zhǔn)品稀釋步驟.png


  二、標(biāo)準(zhǔn)品溶解與稀釋?

  溶解步驟?

  凍干標(biāo)準(zhǔn)品離心后,沿管壁緩慢加入稀釋液,靜置15分鐘再輕柔混勻

  避免直接吹打,防止蛋白變性或損失

  梯度稀釋操作?

  倍比稀釋法?:每管加入等體積稀釋液(如250μL),逐級(jí)稀釋(S7至S0)

  混勻技巧?:溫和顛倒5-8次或低速?gòu)棑芄艿?,避免渦旋

  三、樣品準(zhǔn)備關(guān)鍵點(diǎn)?

  樣本類型? ?處理要求?

  血清/血漿? 離心后立即分裝(-20℃保存),避免反復(fù)凍融;檢測(cè)前用稀釋液預(yù)稀釋(通常1:2起)

  組織勻漿? 裂解后離心取上清,用稀釋液調(diào)整蛋白濃度至檢測(cè)范圍內(nèi)

  細(xì)胞上清? 直接檢測(cè)或按需稀釋(根據(jù)預(yù)估濃度),避免含F(xiàn)BS干擾

  四、注意事項(xiàng)?

  鉤狀效應(yīng)驗(yàn)證?:高濃度樣本需梯度稀釋,觀察OD值是否隨稀釋倍數(shù)增加而升高

  分裝保存?:標(biāo)準(zhǔn)品溶解后建議分裝凍存(-80℃),避免反復(fù)凍融

  環(huán)境控制?:稀釋操作在25±2℃下進(jìn)行,避免溫度波動(dòng)影響蛋白穩(wěn)定性

  注:具體稀釋倍數(shù)需根據(jù)試劑盒說明書及預(yù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果調(diào)整。

  注:以上資料僅供參考,具體詳情來咨詢技術(shù) 老師或品牌供應(yīng)商。

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