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深孔板磁套使用全攻略:選型、操作與常見問題
深孔板磁套是核酸提取實驗中的核心工具,其選型、操作規范及問題處理直接影響實驗效率和數據準確性。以下結合技術原理和實操經驗,為您提供系統指南。
一、選型要點
孔型與材質選擇?
核酸提取?:優先選擇黑色聚丙烯(PP)材質、U型底深孔板,可提升磁珠回收率并減少損失?。
細胞培養?:需錐形孔底設計,降低剪切力并促進氣體交換?。
樣品儲存?:需耐受-80℃低溫,PP材質密封性更優?。
規格匹配?
根據樣品量選擇孔數(如96孔板適合高通量,384孔板適合超高通量)?。
磁套需與深孔板孔型匹配,確保磁棒運動時無偏移?。
二、操作流程
樣本裂解?
將樣本、裂解緩沖液、蛋白酶K加入深孔板,震蕩混勻使DNA結合磁珠?。
磁珠分離?
將深孔板置于磁力架,1分鐘內完成磁珠吸附,棄上清保留磁珠?。
洗滌與洗脫?
加入洗滌緩沖液,震蕩懸浮磁珠后再次吸附,重復2次?。
最后用洗脫液釋放DNA,完成提取?。
三、常見問題與解決
問題現象 可能原因 解決方案
磁珠回收率低 孔底不平整或磁套偏移 更換U型底深孔板,檢查磁套安裝?
交叉污染 磁套未清潔 使用后立即用75%酒精消毒,定期更換老化磁套?
液體殘留 真空壓力過大或吸頭刺穿膜 控制壓力≤5mmHg,沿孔壁加樣?
四、維護建議
清潔?:實驗后立即用去離子水沖洗,避免磁珠殘留?。
儲存?:干燥避光環境存放,避免高溫變形?。
壽命?:磁套磨損或磁力下降時需更換,建議每500次實驗檢查一次?。
通過合理選型、規范操作和定期維護,深孔板磁套可顯著提升核酸提取的穩定性和通量。若需進一步了解自動化設備操作,可參考ST8800全自動核酸提取儀說明書。
注:以上僅供參考,不作為實際數據,實驗需嚴格遵循說明或咨詢技術老師。
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